在現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室中，超微量分光光度計(jì)已成為不可或缺的常規(guī)儀器，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域的蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué)研究。該儀器利用液體的表面張力特性，通過上下臂的接觸拉出固定的光徑，實(shí)現(xiàn)了快速、微量且高濃度的吸光度檢測。

超微量分光光度計(jì)的透射比準(zhǔn)確度和重復(fù)性測量在235nm、257nm、313nm和350nm波長處進(jìn)行，采用重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液（GBW(E)130066）作為樣本。然而，由于超微量紫外可見分光光度計(jì)的結(jié)果以吸光度值表示，而標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特性量值則用透射比表示，且光徑存在差異，因此需要對測量結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

根據(jù)朗伯－比爾定律A=klc，被測物質(zhì)的光程和吸光度值成正比。例如，當(dāng)波長為313nm、光徑為1mm時(shí)，測得的吸光度值為0.030，將其擴(kuò)大10倍后，轉(zhuǎn)化成光徑為10mm的吸光度值為0.300。同理，光徑為0.2mm的吸光度值0.006，擴(kuò)大50倍后也轉(zhuǎn)化為0.300。通過A=-lgT的關(guān)系，可求得透射比T為50.1%。

按照J(rèn)JG178－2007《紫外、可見、近紅外分光光度計(jì)》國家計(jì)量檢定規(guī)程要求，分別在上述四個(gè)波長處測量透射比三次，透射比的最大允許誤差不超過±2.0%，重復(fù)性不超過1.0%，符合Ⅳ級儀器指標(biāo)要求。波長準(zhǔn)確度的測量通過掃描氧化鈥光譜曲線，查找指定波長，最大允許誤差在200nm～340nm區(qū)段不超過±2nm，340nm～900nm區(qū)段不超過±4nm，波長重復(fù)性不超過1nm，同樣符合Ⅳ級儀器指標(biāo)要求。

雜散光的測量則采用生化分析儀校準(zhǔn)用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（濃度為50g/L）。將儀器測量的吸光度值轉(zhuǎn)化成光徑為10mm的吸光度值，再求得透射比。結(jié)果顯示，超微量分光光度計(jì)在340nm波長處的雜散光透射比為0.0%，符合Ⅰ級儀器指標(biāo)要求。

在實(shí)際應(yīng)用中，超微量分光光度計(jì)還面臨零點(diǎn)漂移等問題。通過采用紫外分光光度計(jì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液）檢測儀器透射比準(zhǔn)確度，并測量空白溶液的吸光度值，可以發(fā)現(xiàn)并修正零點(diǎn)漂移，確保測量結(jié)果符合朗伯－比爾定律，提高實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。